Tityus zulianus and Tityus discrepans venoms induced massive autonomic stimulation in mice

Venezuelan scorpion envenomation is a public health problem produced by Tityus discrepans (TD) and Tityus zulianus (TZ) species. Patients-envenomend by TD developed gastrointestinal and pacreatic disorders and scorpion accidents involving TZ are associated with high mortality rate, which showed cardiopulmonary clinical disorders may be associated to the high levels of plasma catecholamines levels. This distinctive clinical output seems to be associated to a toxin repertoire diversity, which has been previously demonstrated. Trying to mimic the human-envenomation, some toxinological studies have been performed using TD and TZ venoms in several biomedels such as mice and anesthetized rams. The purpose of this study was to evaluate, in vivo using biomodels (mice), the role of autonomic nervous system (sympathetic) stimulation producing some of the clinical signs, via the catecholamines release, on the patho-physiology of the TZ and TD induced envenomation. Thus, a clinical signs here reported during a period of 1 hr, after a single intra-peritoneal injection of sub-lethal doses of TZ or TD venom, which are related with diarrhea, diaphoresis, intense salivation, dehydratation, dyspnea and spasticity in hind limbs. However, these animals did not exhibit vomiting, which is the most frequent human-envenomed TD patients. All animals inoculated with (TD or TZ) venoms develped diarrhea being more pronounced in TD group. Diaphoresis, sialorrhea and dehydratation were mainly observed in TD group. Dyspnea and the hind limb spasticity were only developed in TZ mice. These clinical manifestations (diarrhea, sialorrhea, dehydratation and intense salivation) are related to an activation of autonomic nervous system, via an intense release of their related neurotransmitters. Thus, autonomic stimulation (sympathetic) was evaluated following the catecholamine (Nor-Epinephrine) (NE) plasma levels in a function of envenomation time. We found a significant increments at 1 hr,...

El escorpionismo en Venezuela es un problema actual de salud pública producido por las especies de Tityus discrepans (TD) y Tityus zulianus (TZ). Los pacientes que presentan escorpionismo producido por TD desarrollan trastornos gastrointestinales y pancreáticos mientras que los afectados por TZ presentan una alta mortalidad y muestran una sintomatología relacionada a desordenes cardiopulmonares, los cuales parecen estar asociados a niveles elevados de las catecolaminas plasmáticas. Esta clínica diferente parece estar asociada a una composición distinta de toxinas de dichos venenos, lo cual ha sido previamente demostrado. En un intento de mimetizar o reproducir el escorpionismo en humanos se han realizado estudios toxinológicos con los venenos de TZ y TD utilizando varios biomodelos como son ratones y carneros anestesiados. El propósito de este trabajo fue evaluar, “in vivo” usando un Biomodelo (ratones), el papel de la estimulación del sistema nervioso autónomo (simpático) para producir algunos signos clínicos, vía la liberación de catecolaminas, en la fisiopatología del escorpionismo producido por TZ y TD. Así, los signos clínicos aquí descritos y observados durante 1 hr., después de la inyección de una dosis sub-letal de los venenos de TZ y TD, fueron la presencia de diarrea, diaforesis, salivación intensa, deshidratación, disnea y parálisis en las extremidades posteriores. Sin embargo, estos animales no presentaron vómitos, el cual es uno de los signos más frecuentemente observado en los pacientes con accidentes escorpiónicos por TD. Todos los animales inyectados con los venenos de TD y TZ presentaron diarrea especialmente en grupo TD. La disnea y la parálisis en los miembros posteriores fueron sólo observadas en el grupo de ratones inyectados con TZ. Las manifestaciones clínicas como son diarrea, diaforesis y la salivación intensa están asociadas a una activación del sistema nervioso autónomo...

Clonamiento molecular de las asas intracelulares de los receptores muscarínicos m2 y m3 implicadas en la interacción con proteínas g en el músculo liso traqueal de bovino / Molecular cloning of the intracullular ases of the receptors muscarinic m² y mü implecated in the interation with proteins in the muscle smooth tracheal of bovine

En el músculo traqueal de bovino (MLTB) se ha propuesto una vía de señalización celular asociada con la actividad de una guanililciclasa de membrana plasmática (GCm) la cual se encuentra regulada por dos subtipos de receptores muscarínicos (mAChRs) m2 y m3 acoplados a proteínas G de manera opuesta. El objetivo del presemte estudio fue la identificación de las secuencias primarias de las regiones intracelulares de los receptores muscarínicos implicadas en la interacción con las proteínas G que regulan a esta GCm. El cDNA del MLTB fue usado para la amplificación de las regiones intracelulares de los subtipos m2 y m3 utilizando oligonucleótidos cebadores específicos. Los productos de amplificación fueron identificados en geles de agarosa y posteriormente secuenciados, encontrándose un 99 por ciento de similitud con las secuencias obtenidas del bGen Data Bank de los mACHRs en cerebro de bovino. Este es el primer clonamiento molecular para los mACHRs presentes en MLTB y sugiere posibles similitudes con el cerebro de bovino en relación a la interacción receptor/proteína G

Efecto de la toxina pertussis sobre la actividad guanilil ciclasa dependiente de Mg²+ en el músculo liso traqueal de bovino / Effect of the pertussis toxins on the guanylate cyclase dependent activity of Mg² + in the tracheal musde smooth of bovine

Las membranas plasmáticas de músculo liso traqueal de bovino presentan una actividad de guanililciclasa dependiente de Mg²+, determinada utilizando radioinmunoensayo para GMPc, sobre la cual se estudió el efecto de la toxina pertussis. Se observó un comportamiento bimodal dependiente de la concentración de Mg²+: efecto estimulatorio hasta una concentración de Mg²+ 2mM y efecto inhibitorio a concentraciones mayores del ión. El agonista carbamilcolina también mostró un efecto dual sobre esta actividad enzimática: estimulatorio hasta 10-9 M e inhibitorio a concentraciones mayores. La toxina pertussis produce un efecto bloqueador de la guanililciclasa dependiente de Mg²+ y eso permite concluir que dicha actividad es modulada por proteína Go/Gi en forma similar a lo descrito previamente para la actividad guanililciclasa dependiente de Mn²+ en la misma fracción de membranas, pero en el caso de la actividad dependiente de Mg²+, aparentemente se requiere del componente inhibitorio de la proteína G para ejercer su función

Presencia de guanilil ciclasas sensibles a los péptidos natriuréticos ANP y CNP en el músculo liso traqueal de bovino / Guanylyl cyclases sensibility to natriuretic peptide ANP and CNP in the tracheal muscle smooth of bovine

La producción de GMP cíclico en el músculo liso traqueobronquial de bovino (MLTB) es catalizada por guanilil ciclasas soluble (sGC) y particulada (mGC). Para la identificación de la mGC involucrada en la regulación muscarínica, via receptores M2 y M3 del tono de MTLB, se amplificó a partir de cDNA obtenido del MLTB una región conservada en el dominio catalítico de todas las GC. La secuenciación de los productos de RT-PCR reveló que el 76 por ciento de los transcriptos codifican para la subunidad ß1 de sGC y el 24 por ciento para la isoforma B (sensible al péptido CNP) de la mGc. RT-PCRs con oligonucléotidos isoforma-específicos mostraron que las isoformas sensibles a los péptidos ANP y guanilina también se expresan en el MLTB. La activación máxima de mGC obtenida con CNP resultó significativamente (p<0.001) superior a la lograda con ANP, indicando que la isoforma B es la mGC predominante en este tejido